1.每次做盡量要把陰陽(yáng)空三個(gè)對(duì)照做好,如出現(xiàn)問題也好剖析.
2.顯色:顯色體系又許多,咱們一開始做的時(shí)分,要選擇適宜的顯色體系.留意顯色體系酶活性底物的保存HRP結(jié)合物加硫柳泵，AP結(jié)合物可加疊氮鈉.
3.加抗體標(biāo)本(和二抗):留意該換槍頭時(shí)換槍頭.標(biāo)本稀釋一般可用pbs稀釋,也可用封閉液去稀釋.如需加二抗,還要留意二抗的作業(yè)濃度,太高zao蹋,太低則著色淺.
4.洗滌板：可以說在ELISA操作中，洗刷是zui首要的關(guān)鍵技術(shù)。因?yàn)榫郾揭蚁┑人芰蠈?duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，為抵達(dá)分離游離的和結(jié)合的酶符號(hào)物的目的,*殘留在板孔中游離的物質(zhì)，以及非特異性地吸附的攪擾物質(zhì),在洗刷時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的攪擾物質(zhì)洗刷下來。所以在洗板時(shí)會(huì)有一定差錯(cuò)，人為因素很大（當(dāng)然有條件的用洗板機(jī)除外），洗的不*或串了孔，對(duì)如此靈敏的ELISA體系但是不小的影響。
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